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小鼠髓磷脂堿性蛋白（MBP）ELISA試劑盒使用方法:

測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

12μg/ml    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

6μg/ml     3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

3μg/ml     2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5μg/ml   1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 

4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

蛋白標(biāo)準(zhǔn)(5mg/ml BSA)1ml

BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(增強(qiáng)型)5000次

BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(增強(qiáng)型)500次

BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(增強(qiáng)型)200次

BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒5000次

BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒500次

BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒200次

Western及IP細(xì)胞裂解液100ml

RIPA裂解液(強(qiáng))100ml

RIPA裂解液(中)100ml

RIPA裂解液(弱)100ml

RIPA裂解液(強(qiáng)中弱套裝)共150ml

NP-40裂解液100ml

SDS裂解液100ml

Western及IP細(xì)胞裂解液(無抑制劑)100ml

RIPA裂解液(強(qiáng)，無抑制劑)100ml

細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒 50次

細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒100次

細(xì)胞膜蛋白與細(xì)胞漿蛋白提取試劑盒100次

細(xì)胞線粒體分離試劑盒50-100次

組織線粒體分離試劑盒50-100次

紅細(xì)胞裂解液120ml

細(xì)胞與組織裂解液(一氧化氮檢測(cè)用)100ml

PMSF(100mM)10ml

BeyoGoldTM His-tag Purification Resin10ml

BeyoGoldTM His-tag Purification Resin100ml

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