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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Human/Mouse/Rat BDNF protein

產(chǎn)品中文名稱：重組人/小鼠/大鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子BDNF

規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號(hào)：EY-01X8704
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

標(biāo)簽:無(wú)標(biāo)簽

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:人

序列:氨基酸序列來(lái)源于人/小鼠/大鼠源： BDNF 蛋白（His129-Arg247）表達(dá)的蛋白片段，C-端有 6×His 標(biāo)記。

活性:通過其誘導(dǎo)轉(zhuǎn)染有TrkB的BaF3細(xì)胞增殖的能力來(lái)衡量。這種效應(yīng)的ED50<2 ng/mL。

蛋白長(zhǎng)度：該蛋白質(zhì)的計(jì)算分子量為 14.45 kDa，在還原條件下，蛋白質(zhì)遷移為 14 kDa（SDS-PAGE 分析）。

純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測(cè)

采用 LAL 法檢測(cè)，每 1 μg 蛋白質(zhì)中的 EU 含量小于動(dòng)?動(dòng)

背景

腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）是神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素家族的一員，不僅主要在海馬、杏仁核、大腦皮層、下丘腦和小腦中表達(dá)，而且在血小板和循環(huán)血漿中也被檢測(cè)到。BDNF 是一種 27.8 kDa 的蛋白質(zhì)，含有 247 個(gè)殘基，在調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)不同區(qū)域的突觸傳遞和可塑性方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。此外，BNDF 還可作為海馬突觸傳遞中與記憶相關(guān)的長(zhǎng)期電位調(diào)節(jié)劑。

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡(jiǎn)便、快捷。可直接加入到檢測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Caspase-1 (ICE; CASP-1;P45 0.5mgCaspase-1 (ICE; CASP-1;P45) 天冬-胱特異性蛋白酶家族(抗原)

GSTM2 Protein Human 重組人 GSTM2 / GST4 蛋白

CD1D重組小鼠 CD1D / R3G1 蛋白 Protein

GFRA1 Protein Rat 重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ENO2重組人 NSE / ENO2 / Enolase 2 蛋白 Protein

小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human vitamin D receptor (VD R) ELISA Kit 人受體(VD R)檢測(cè)試劑盒

Humanai-zonapellucidaaibody,aZPELISAKit 人抗透明帶抗體(aZP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancholesterol,CH檢測(cè)試劑盒人(CH)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

紫外線處理DNA損傷彗星熒光檢測(cè)試劑盒20次

HumansecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit人分泌型0脂酶A2(sPLA2)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔乙酰(ACh)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔合成酶(NOS)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠顆粒酶A(GZMA)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： GZMA ELISA Kit

Mouse apolipoprotein H (Apo-H) ELISA Kit 小鼠載脂蛋白H(Apo-H)檢測(cè)試劑盒

RatPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFSH促卵泡生成素

細(xì)胞環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1/2)總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次

RatplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組人/小鼠/大鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子BDNFCD1D重組小鼠 CD1D / R3G1 蛋白 Protein

Caspase-1 (ICE; CASP-1;P45 0.5mgCaspase-1 (ICE; CASP-1;P45) 天冬-胱特異性蛋白酶家族(抗原)

ENO2重組人 NSE / ENO2 / Enolase 2 蛋白 Protein

GSTM2 Protein Human 重組人 GSTM2 / GST4 蛋白

GFRA1 Protein Rat 重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)