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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：大鼠支氣管成纖維細胞

英文名稱：Rat Bronchial Fibroblast Cells

組織來源：支氣管組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

大鼠支氣管成纖維分離自支氣管組織；支氣管（Bronchi），是指由氣管分出的各級分枝，由氣管分出的一級支氣管，即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細長，走向傾斜；后者較粗短，走向較前者略直，所以經(jīng)氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是，氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架，而支氣管不是。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的支氣管成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。支氣管成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài)，合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。

公司實驗室分離的大鼠支氣管成纖維采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠支氣管成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠蛋白激酶G(PKG)檢測試劑盒 ，英文名： PKG ELISA Kit

Pig angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 豬血管生成素2(ANG-2)檢測試劑盒

病毒H5亞型核酸檢測試劑盒(熒光PCR法) 48T

CLIAKitforLPS(HumanLipopolysaccharides)ELISAKit人脂多糖/內(nèi)毒素

通用免疫化學(xué)固著溶液10毫升

ELISAKitPPP雞蛋卵黃高0蛋酸肽

BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CCR-1(CC chemokine receptor 1 0.5mgCCR-1(CC chemokine receptor 1) 細胞表面趨化因子受體1抗原

PTPMT1重組人 PTPMT1 蛋白 Protein

CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白

CD63 Protein Rat 重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白

CCR-1(CC chemokine receptor 1 0.5mgCCR-1(CC chemokine receptor 1) 細胞表面趨化因子受體1抗原

CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白

BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CD63 Protein Rat 重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白

PTPMT1重組人 PTPMT1 蛋白 Protein

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat glamic acid decarboxylase aoaibody (GAD-Ab) ELISA Kit 大鼠谷脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)檢測試劑盒

Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISAKit 人β-促脂素(β-LPH)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenGlucagon,GC檢測試劑盒雞胰高血糖素(GC)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞CASPASE-7蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

Mousehemeoxygenase2,HO-2ELISAKit小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠支氣管成纖維細胞小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶檢測試劑盒   小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒、小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠血管緊張素原檢測試劑盒   小鼠血管緊張素原試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠血管緊張素原試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血管緊張素原試劑盒、小鼠血管緊張素原檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠血管緊張素檢測試劑盒   小鼠血管緊張素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠血管緊張素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血管緊張素試劑盒、小鼠血管緊張素檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠血管活性腸肽檢測試劑盒   小鼠血管活性腸肽試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠血管活性腸肽試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血管活性腸肽試劑盒、小鼠血管活性腸肽檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用