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① 組織塊培養法

組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

產品名稱：人膀胱平滑肌細胞

英文名稱：Human Bladder Smooth Muscle Cells

組織來源：膀胱組織

產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

人膀胱平滑肌分離自膀胱組織；膀胱是主要由平滑肌細胞組成的中空器官，膀胱平滑肌的舒張和收縮使得膀胱分別儲存和排出尿液。膀胱平滑肌細胞表型的調控和可誘導一氧化氮合酶的表達與多種病理狀況有關，包括膀胱功能障礙。研究表明，組織缺氧抑制膀胱平滑肌細胞的增殖，膀胱平滑肌細胞的分化依賴于膀胱上皮細胞釋放的因子。膀胱平滑肌細胞外基質的分泌表型可通過細胞所經歷的機械變形頻率而改變。平滑肌是許多疾病中的共同路徑，因此，了解在疾病發生及持續過程中平滑肌怎樣變化，這是治療方法取得進展的重要一步。膀胱壁由三層組織組成，由內而外為黏膜層、肌層和外膜。其中，肌層主要由平滑肌構成。膀胱平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。體外培養膀胱平滑肌細胞不僅為組織工程膀胱、尿道提供種植細胞的必要手段，也是研究平滑肌瘤的基礎與前提。

公司實驗室分離的人膀胱平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的人膀胱平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖，必須將現有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。

胃動蛋白2   英文名稱：   Human Gasokine 2   規格：      英文縮寫：   GKN-2

內源性糖皮質激素   英文名稱：   Human Glucocoicoid Endogenous   規格：      英文縮寫：   GC

葡萄糖激酶   英文名稱：   Human Glucokinase   規格：      英文縮寫：   GCK

葡萄糖60酸脫氫酶   英文名稱：   Human Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase   規格：      英文縮寫：   G6PD

小鼠蛋白質二硫鍵異構酶(PDI)ELISA 試劑盒

Rat urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 大鼠型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒

Humanai-immunodeficiencyvirusaibody,HIVELISAKit 人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)試劑盒 進口分裝

Humanasymmeicaldimethylarginine,ADMA試劑盒人不對稱二甲基精(ADMA)試劑盒

植物源性食品土豆(potato)試劑盒20次

Humahymicsomallymphopoietin,TSLPELISAKit人基質淋巴細胞生成素(TSLP)試劑盒

EPCAM重組大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白  Protein

Gentamicin/OVA 慶大偶聯雞卵白蛋白 2mgGentamicin/OVA 慶大偶聯雞卵白蛋白

SPEG重組人 SPEG / APEG-1 蛋白 (His 標簽) Protein

FGF19 Protein Human 重組人 FGF19 蛋白

ECM1 Protein Mouse 重組小鼠 ECM1 蛋白 (His 標簽)

Gentamicin/OVA 慶大偶聯雞卵白蛋白 2mgGentamicin/OVA 慶大偶聯雞卵白蛋白

FGF19 Protein Human 重組人 FGF19 蛋白

EPCAM重組大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白  Protein

ECM1 Protein Mouse 重組小鼠 ECM1 蛋白 (His 標簽)

SPEG重組人 SPEG / APEG-1 蛋白 (His 標簽) Protein

人膀胱平滑肌細胞大鼠細胞色素P450家族成員1A1(CYP1A1)試劑盒 ，英文名： CYP1A1 ELISA Kit

Mouse epinephrine (EPI) ELISA Kit 小鼠(EPI)試劑盒

MouseCholecystokinin,CCKELISAKit 小鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforHSP-70(HumanHeatShockProtein70)ELISAKit人熱休克蛋白70

細胞KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定性試劑盒20次

ELISAKitIL-2大鼠白介素2

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養瓶充滿培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產品僅用于科學研究或者工業科研等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用