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產品名稱:人外周血單個核細胞

產品特點:人外周血單個核細胞公司正在出售的產品NLGN1 Others Human 人 NLGN1 / Neuroligin-1 人細胞裂解液 NRG1 Others Canine 狗 NRG1-alpha (EGF Domain) 人細胞裂解液 TF Others Human 人 ansferrin / TF 人細胞裂解液

產品型號:

更新日期:2024-12-12

訪問次數:417

人外周血單個核細胞的詳細資料:

人外周血單個核細胞

實驗報告:

人外周血單個核細胞
一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細胞簡介:

人外周血單個核細胞

人外周血單個核分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。外周血單個核細胞(PBMC)即外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。目前,主要的分離方法是密度梯度離心法,因為血液中各有形成分的比重存在差異,因此得以分離出不同的細胞。

產品名稱

人外周血單個核細胞

組織來源

外周血

英文名稱

Human Peripheral   Blood Mononuclear Cells

產品規格

5×105cells/T25細胞培養瓶

 

方法簡介:

人外周血單個核細胞

公司實驗室分離的人外周血單個核采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的人外周血單個核經過檢測,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息:

人外周血單個核細胞

培養基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 半貼半懸浮

細胞形態 圓形

傳代特性 不增殖;不傳代

消化液 0.25%

培養條件 氣相:空氣,95%CO25%

人外周血單個核細胞

注意事項:

人外周血單個核細胞
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養基重懸細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產品:
人外周血單個核細胞

小鼠免疫細胞表面抗原分子CD8+   英文名稱:   Mouse Cluster of Differeiation 8+   規格:      英文縮寫:   CD8+

小鼠免疫細胞表面抗原分子8   英文名稱:   Mouse Cluster Of Differeiation 8   規格:      英文縮寫:   CD8+

小鼠1型膠原   英文名稱:   Mouse Collagen Type 1   規格:      英文縮寫:   C1

小鼠3型膠原   英文名稱:   Mouse Collagen Type 3   規格:      英文縮寫:   C3

小鼠去甲(NE)試劑盒 96T/48T

Human urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 人型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒

Humanmammaliaargetofrapamyein,mTORELISAKit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)試劑盒 96T/48T 進口分裝

GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4試劑盒豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒規格:96T/48T

真菌/酵母細胞可溶性總蛋白制備試劑盒20

MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit小鼠腦源性神經營養因子(BDNF)試劑盒規格:96T/48T

CD200重組食蟹猴 CD200 蛋白 (Fc 標簽) Protein

MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a 0.5mgMAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓鞘相關糖蛋白(抗原)

FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標簽) Protein

CRIP2 Protein Human 重組人 CRIP2 蛋白

CAMK4 Protein Mouse 重組小鼠 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (His & GST 標簽)

MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a 0.5mgMAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓鞘相關糖蛋白(抗原)

CRIP2 Protein Human 重組人 CRIP2 蛋白

CD200重組食蟹猴 CD200 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CAMK4 Protein Mouse 重組小鼠 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (His & GST 標簽)

FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標簽) Protein

人外周血單個核細胞大鼠神經元衍生孤兒受體1(NOR1)試劑盒 ,英文名: NOR1 ELISA Kit

Mouse surface membrane immunoglobulin (SmIg) ELISA Kit 小鼠細胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)試劑盒

Ratacetylcholine,ACHELISAKit 大鼠乙酰(Ach)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHBsAb(Humanai-hepatitisBvirussurfaceaibody)ELISAKit人抗乙型肝病毒表面抗體

細胞艾滋病毒1蛋白酶(HIV-1PROTEASE)活性熒光淬滅法定量試劑盒20

SheepIerleukin1β,IL-1βELISAKit綿羊白介素1β(IL-1β)試劑盒規格:96T/48T


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