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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔胚肝間充質(zhì)干細(xì)胞

英文名稱：Rabbit Embryo Hepatic Mesenchymal Stem Cells

組織來(lái)源：胚胎肝

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

兔胚肝間充質(zhì)干分離自胚胎肝組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官，并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞。在不同的誘導(dǎo)條件下，可分化為多種造血細(xì)胞以外的組織細(xì)胞，并具有造血支持、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等作用。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞，存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細(xì)胞因子及生長(zhǎng)因子，促進(jìn)造血干細(xì)胞（HSC）的增殖與分化。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎和組織修復(fù)作用，可減輕移植物抗宿主病（GVHD）及其他移植相關(guān)并發(fā)癥。胚胎肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞中含有MSC，且量較大，可成為種子細(xì)胞。

實(shí)驗(yàn)室分離的兔胚肝間充質(zhì)干采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的兔胚肝間充質(zhì)干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基：含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔胚肝間充質(zhì)干體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無(wú)用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開(kāi)，使細(xì)胞解離出來(lái)。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

大鼠γ-基受體亞基α1(GABRA1)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： GABRA1 ELISA Kit

Mice, superoxide dismase (SOD) ELISA Kit 小鼠超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒

ELISA 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-2(mouse MMP-2)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-17ELISAKIT大鼠白介素17

通用型亮(leucine)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitADAMTS13/vWF-cp大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶

IFNA5重組小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

角蛋白1(KRT1)重組蛋白 Recombinant Keratin 1 (KRT1)

BIN2重組人 BIN2 / BRAP-1 蛋白 Protein

IL12RB1 Protein Human 重組人 IL12RB1 / IL12RB / CD212 蛋白

HAVCR1 Protein Canine 重組狗 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白

角蛋白1(KRT1)重組蛋白 Recombinant Keratin 1 (KRT1)

IL12RB1 Protein Human 重組人 IL12RB1 / IL12RB / CD212 蛋白

IFNA5重組小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HAVCR1 Protein Canine 重組狗 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白

BIN2重組人 BIN2 / BRAP-1 蛋白 Protein

豚鼠特異性免疫球蛋白E(sIgE)檢測(cè)試劑盒 96T/48T

Human systemic lupus erythematosus (SLE) ELISA Kit 人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)檢測(cè)試劑盒

Humanansthyretin,TELISAKit 人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanc-sis檢測(cè)試劑盒人c-sis檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織EGFR激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Humanprostacycline,PGIELISAKit人前列環(huán)素(PGI)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔胚肝間充質(zhì)干細(xì)胞神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素 4(-4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T  

骨橋蛋白 ( Osteopoin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   德國(guó) IBL

OX-40 ELISA Kit   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender

Human sP53 Kit   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   法國(guó) Diaclone

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用