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細胞簡介：

兔外周血白分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。白細胞是一類無色、球形、有核的血細胞。白細胞不是一個均一的細胞群，根據(jù)其形態(tài)、功能和來源部位可以分為三大類：粒細胞、單核細胞和淋巴細胞，其中粒細胞又可根據(jù)胞質(zhì)中顆粒的染色性質(zhì)不同，分為中性粒細胞、嗜酸粒細胞和嗜堿粒細胞三種。根據(jù)白細胞的細胞質(zhì)內(nèi)有無特殊顆粒，可將其分為有粒白細胞和無粒白細胞。前者常簡稱為粒細胞，根據(jù)其特殊顆粒的染色特性，又分為中性粒細胞、嗜堿性粒細胞和嗜酸性粒細胞，白細胞也通常被稱為免疫細胞。在顯微鏡下可以看到，血細胞中體積比較大、數(shù)量比較少，具有細胞核；其主要作用是吞噬細菌、防御疾病。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔外周血白采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的兔外周血白經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 懸浮

細胞形態(tài) 圓形

傳代特性 不增殖；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔外周血白體外培養(yǎng)周期有限；建議使用公司

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠狀腺原酸(T3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠補體片斷5a(C5a)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠補體片斷3a(C3a)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠17羥孕(17-OHP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠結(jié)合蛋白(RBP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit A(IgA)試劑盒

HumanAquaporin2,AQP-2ELISAKit 人水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Elisa偽狂犬病毒gE2.0抗體診斷試劑盒5*96孔5*96孔

真菌/酵母a-(a-AMYLASE)活性EPS-G7酶偶聯(lián)比色法定量試劑盒20次

MouseC-telopeptideoftypeⅠcollagen,CTX-ⅠELISAKit小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

HAVCR2重組食蟹猴 TIM3 / HAVCR2 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II 0.5mgIGF-II( Insulin-like Growth Factor-II ) 胰島素樣生長因子-II(抗原)

MMP8重組人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein

CMPK1 Protein Human 重組人 CMPK1 蛋白

PRL Protein Mouse 重組小鼠 PRL / Prolactin 蛋白

IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II 0.5mgIGF-II( Insulin-like Growth Factor-II ) 胰島素樣生長因子-II(抗原)

CMPK1 Protein Human 重組人 CMPK1 蛋白

HAVCR2重組食蟹猴 TIM3 / HAVCR2 蛋白 (Fc 標簽) Protein

PRL Protein Mouse 重組小鼠 PRL / Prolactin 蛋白

MMP8重組人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein

兔外周血白細胞大鼠甲狀旁腺素受體2(PTHR2)試劑盒 ，英文名： PTHR2 ELISA Kit

Mouse tumor necrosis factor soluble receptor I (TNFsR- I) ELISA Kit 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)試劑盒

Ratcarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit 大鼠酶2(CA-2)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFEP(HumanFreeerythrocyteproloporphyrin)ELISAKit人游離原卟啉

細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)活性熒光定量試劑盒20次

Ratnuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISAKit大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)試劑盒規(guī)格：96T/48T

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。