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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔陰道平滑肌細胞

英文名稱：Rabbit Vaginal Smooth Muscle Cells

組織來源：陰道

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

兔陰道平滑肌分離自陰道組織；陰道位于膀胱、尿道和直腸之間，是一個富有彈性的管狀器官。它在生殖過程中具有多種生理功能，是連接子宮與外陰的通道，是排出月經(jīng)血、娩出嬰兒的必經(jīng)之路，也是一個重要的性交器官。陰道壁按組織學(xué)由外到內(nèi)分三層，即黏膜層、肌層和外膜。平滑肌，是非橫紋肌的肌肉組織。分布在機體動脈和靜脈血管壁、膀胱、子宮、生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。陰道平滑肌分離自陰道壁肌層組織，平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。

實驗室分離的兔陰道平滑肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔陰道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔陰道平滑肌體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

兔子白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒

Human vascular endothelial cell growth factor receptor 3 (VEGFR-3) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3)檢測試劑盒

Humanα1-microglobulin,α1-MGELISAKit 人α1微球蛋白(α1-MG)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanEsiol,E3檢測試劑盒人雌三醇(E3)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織SPHK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Humanorosomucoid,ORMELISAKit人類粘蛋白(ORM)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

LTA4H重組小鼠 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 Protein

Batroxobin Protein 蛇毒巴曲酶全蛋白 1mgBatroxobin Protein 蛇毒巴曲酶全蛋白

CALML3重組人 CALML3 蛋白 Protein

IL23 Protein Human 重組人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白

HGF Protein Rat 重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

Batroxobin Protein 蛇毒巴曲酶全蛋白 1mgBatroxobin Protein 蛇毒巴曲酶全蛋白

IL23 Protein Human 重組人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白

LTA4H重組小鼠 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 Protein

HGF Protein Rat 重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

CALML3重組人 CALML3 蛋白 Protein

豚鼠鉤端IgG(Lebtospira)檢測試劑盒 ，英文名： Lebtospira ELISA Kit

Human telomerase (TE) ELISA Kit 人端粒酶(TE)檢測試劑盒

Rabbittumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISAKit 兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforbFGF(Rabbitbasicfibroblastgrowthfactor)ELISAKit兔子堿性成纖維細胞生長因子

細菌糖酵解IMViC檢測試劑盒20次

rabbitIerferonγ,IFN-γELISAKit兔子γ干擾素(IFN-γ)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔陰道平滑肌細胞人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人單皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人前列腺特異性抗原(PSA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用