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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：小鼠髂動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

英文名稱：Mouse Lliac Artery Endothelial Cells

組織來(lái)源：髂動(dòng)脈

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

小鼠髂動(dòng)脈內(nèi)皮分離自髂動(dòng)脈組織；髂總動(dòng)脈位于機(jī)體的盆腔，小鼠的髂總動(dòng)脈有兩條，也就是臨床上左右兩條分支，它是由腹部主要的動(dòng)脈演化而來(lái)，由腹部的腹主動(dòng)脈沿著機(jī)體的脊柱方向向下進(jìn)行，到達(dá)第4腰椎后開(kāi)始分成兩支，這就是左右髂總動(dòng)脈。動(dòng)脈是介于心室與毛細(xì)血管之間的管道，它接近心室的部分，管徑大，管壁較厚。經(jīng)過(guò)反復(fù)分支，管徑逐漸變小，管壁變薄，后形成與毛細(xì)血管構(gòu)造相似的毛細(xì)血管前小動(dòng)脈，與毛細(xì)血管相接。動(dòng)脈的管徑大小和管壁的厚薄，雖相差很大，但構(gòu)造上均有共同之處。一般均由3層膜組成，內(nèi)層稱為內(nèi)膜，由內(nèi)皮及縱行排列的結(jié)締組織構(gòu)成；中間的一層稱為中膜，由環(huán)形排列的組織構(gòu)成；外的一層叫外膜，由縱行排列的結(jié)締組織構(gòu)成。動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是覆蓋在主動(dòng)脈內(nèi)面的單層細(xì)胞，可分泌一系列血管活性物質(zhì)而保持血管穩(wěn)態(tài)，當(dāng)其受到炎癥或其它因素刺激后穩(wěn)態(tài)被破壞而導(dǎo)致一些心血管疾病的發(fā)生。因此，動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞已成為研究心血管疾病發(fā)病機(jī)制及治療藥物的工具。內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細(xì)胞，由一層扁平細(xì)胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至小的微血管。

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠髂動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠髂動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠髂動(dòng)脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無(wú)用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開(kāi)，使細(xì)胞解離出來(lái)。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

大鼠神經(jīng)降壓素()檢測(cè)試劑盒 ，英文名：  ELISA Kit

Mouse plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)檢測(cè)試劑盒

RatEpithelialneuophilactivatingpeptide78,ENA-78ELISAKit 大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHBcAb乙型肝核心抗體

細(xì)胞半胱蛋白酶-3(CASPASE-3)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

RatVitaminD3,VD3ELISAKit大鼠3(VD3)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

HA重組甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

Rho C(Ras homolog gene family member C 0.5mgRho C(Ras homolog gene family member C) RhoC抗原

EFNA3重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 / EFL2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CXCL3 Protein Human 重組人 CXCL3 / GRO gamma 蛋白

ICAM1 Protein Human 重組人 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

Rho C(Ras homolog gene family member C 0.5mgRho C(Ras homolog gene family member C) RhoC抗原

CXCL3 Protein Human 重組人 CXCL3 / GRO gamma 蛋白

HA重組甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

ICAM1 Protein Human 重組人 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

EFNA3重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 / EFL2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

小鼠0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human glucose anspoer 1 (GL1) ELISA Kit 人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GL1)檢測(cè)試劑盒

Humanmicrotubule-associatedprotein2,MAP-2ELISAKit 人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAcylationStimulatingProtein,ASP檢測(cè)試劑盒人酰化刺激蛋白(ASP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂質(zhì)過(guò)氧化物(linoleicacid)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20次

Mouseamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISAKit小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠髂動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞小鼠解脲脲原體抗體檢測(cè)試劑盒   小鼠解脲脲原體抗體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠解脲脲原體抗體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠解脲脲原體抗體試劑盒、小鼠解脲脲原體抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子檢測(cè)試劑盒   小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子試劑盒、小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠角化細(xì)胞分泌因子檢測(cè)試劑盒   小鼠角化細(xì)胞分泌因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠角化細(xì)胞分泌因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠角化細(xì)胞分泌因子試劑盒、小鼠角化細(xì)胞分泌因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠抗α-胞襯蛋白抗體檢測(cè)試劑盒   小鼠抗α-胞襯蛋白抗體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠抗α-胞襯蛋白抗體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗α-胞襯蛋白抗體試劑盒、小鼠抗α-胞襯蛋白抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用