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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：豬腦微血管內皮細胞

英文名稱：Porcine Brain Microvascular Endothelial Cells

組織來源：腦

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

豬腦微血管內皮分離自腦組織；腦微血管內皮細胞是血腦屏障的主要組成成分，它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細胞，能夠限制可溶性物質和細胞等從血液進入大腦，大腦微血管內皮細胞與外周內皮細胞相比具有一些相同特性。它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在腦血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。與外周內皮細胞相同，大腦微血管內皮細胞表面表達細胞粘附分子，調控白細胞進入大腦。由于微血管內皮細胞的器官特異性，內皮細胞通常取源于疾病研究的相關組織。其主要特征如下：①腦微血管內皮細胞存在許多細胞間緊密連接，產(chǎn)生很高的跨內皮阻抗，延遲細胞旁的通量；②腦微血管內皮細胞缺乏內皮細胞的窗孔結構，其液相物質胞飲水平較低；③腦微血管內皮細胞具有不對稱定位酶和載體介導轉運系統(tǒng)，從而產(chǎn)生“兩極分化"的表現(xiàn)型。

實驗室分離的豬腦微血管內皮采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的豬腦微血管內皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：基礎培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：內皮細胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

豬腦微血管內皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)檢測試劑盒 ，英文名： 8-OHdG ELISA Kit

Mouse maix metalloproteinase 13 (MMP-13) ELISA Kit 小鼠基質金屬蛋白酶13(MMP-13)檢測試劑盒

Mouseglucocoicoidreceptor-α,GR-αELISAKit 小鼠糖皮質激素受體α(GR-α)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanSH2-coainingprotein,SHC/SLP-76ELISAKit人SH2攜帶蛋白

通用型支鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitFⅡ大鼠Ⅱ

CD200重組小鼠 CD200 蛋白 Protein

CD4 CD4(抗原 0.5mgCD4 CD4(抗原)

S100B重組人 S100B 蛋白 Protein

EED Protein Human 重組人 EED / Embryonic Ectoderm Development 蛋白 (His & GST 標簽)

CD274 Protein Mouse 重組小鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (His & Fc 標簽)

CD4 CD4(抗原 0.5mgCD4 CD4(抗原)

EED Protein Human 重組人 EED / Embryonic Ectoderm Development 蛋白 (His & GST 標簽)

CD200重組小鼠 CD200 蛋白 Protein

CD274 Protein Mouse 重組小鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (His & Fc 標簽)

S100B重組人 S100B 蛋白 Protein

小鼠金屬硫蛋白(MT) ELISA 試劑盒 96T/48T

Human milk ansferrin / lactoferrin aibody IgG (LF/LTF Ab-Ig 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig

HumanProteinPhosphatase,PPELISAKit 人蛋酸酶(PP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-braiissueaibody,ABAb檢測試劑盒人抗腦組織抗體(ABAb)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物過氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

HumanαN-acetylglucosaminidase,αNAGELISAKit人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬腦微血管內皮細胞小鼠(AZT)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠凋亡誘導因子(AIF)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠凋亡抑制基因（Bcl-2）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠凋亡信號調節(jié)激酶I(ASK-1)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用